We propose a new statistical approach to obtain differential gene expression of non-detects in quantitative real-time PCR (qPCR) experiments through Bayesian hierarchical modeling. We propose to treat non-detects as non-random missing data, model the missing data mechanism, and use this model to impute Ct values or obtain direct estimates of relevant model parameters. A typical laboratory does not have the resources to perform experiments with a large number of replicates; therefore, we propose an approach that does not rely on large sample theory. We aim to demonstrate the possibilities that exist for analyzing qPCR data in the presence of non-random missingness through the use of Bayesian estimation. Bayesian analysis typically allows for smaller data sets to be analyzed without losing power while retaining precision. The heart of Bayesian estimation is that everything that is known about a parameter before observing the data (the prior) is combined with the information from the data itself (the likelihood), resulting in updated knowledge about the parameter (the posterior). In this work we introduce and describe our hierarchical model and chosen prior distributions, assess the model sensitivity to the choice of prior, perform convergence diagnostics for the Markov Chain Monte Carlo, and present the results of a real data application.


翻译:我们建议采用新的统计方法,通过Bayesian等级模型,在定量实时PCR(qPPCR)实验中获取非探测性非探测性基因的不同基因表现;我们提议将非探测性数据视为非随机缺失的数据,模拟缺失的数据机制,并使用这一模型来估算Ct值或直接估计相关模型参数。典型的实验室没有资源进行大量复制的实验;因此,我们建议一种不依赖大样本理论的方法;我们的目的是展示在使用Bayesian估计值时,在非随机缺失的情况下分析qPCR数据的可能性。Bayesian分析通常允许在不失去能量的情况下对较小数据集进行分析,同时保留精确度。Bayesian估计的核心是,在观察数据之前(前)所知道的关于参数的一切情况都与数据本身(可能性)的信息结合起来,从而获得关于参数(后方)的最新知识。我们在此工作中介绍和描述我们的等级模型和先前选择的分布,评估模型对先前数据选择的模型敏感性,并评估当前数据链级分析结果。

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