基于多环链接发夹型探针多聚荧光技术构建NSCLC耐药与循环miRNAs表达微阵列研究

项目名称： 基于多环链接发夹型探针多聚荧光技术构建NSCLC耐药与循环miRNAs表达微阵列研究

项目编号： No.81371641

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 陈庆海

作者单位： 中国人民解放军第三军医大学

项目金额： 70万元

中文摘要： 非小细胞肺癌（NSCLC）化疗耐药与循环miRNAs精确表达谱国内外未见报道，明确miRNA表达与NSCLC耐药可减少用药盲目性。短小而微量的循环miRNA常需通过茎-环和加尾RT-PCR等复杂扩增进行检测。发夹探针环序列与miRNA长度相当而适用其检测；探针固定在载体表面可高通量检测miRNA，但受固定难题制约。断接式发夹探针是解决保留原始荧光FRET现象探针固定难题的重要进步，但存在灵敏度和检测限的技术瓶颈。基于前期研究基础，本研究打破载体表面单位点只能固定单个探针的局限性，以茎结构改造为突破口，设计了新型多环链接发夹探针：通过纳磁微球表面多个游离探针茎链接聚集和外磁场富集作用（即多聚荧光技术），显著提高灵敏度、拓宽检测限，并构建NSCLC耐药miRNA表达发夹探针微阵列及明确miRNA耐药表达谱，达到无需扩增/超灵敏检测循环miRNA的目的。该研究对NSCLC个体化用药等具重要意义。

中文关键词： 多环链接发夹型DNA探针；多聚荧光；循环miRNA；非小细胞肺癌；微阵列

英文摘要： The reports of accurate express chart between non-small cell cancers resistance drug and overall circle miRNAs could been found in world at present. The complicated amplify technologies such as stem-loop RT-PCR and RT-PCR with modified polyA are often use

英文关键词： Hairpin DNA probe connected with many loops；Fluorescent signal gather as many times；Blood miRNAs；Non-small cell lung cancers；Microarry