通过靶向泛素化降解K-Ras癌蛋白逆转胰腺癌细胞的恶性生物学特性的研究

项目名称： 通过靶向泛素化降解K-Ras癌蛋白逆转胰腺癌细胞的恶性生物学特性的研究

项目编号： No.30973470

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 陈杰

作者单位： 中国医学科学院

项目金额： 31万元

中文摘要： "靶向泛素化降解蛋白质"技术是利用泛素-蛋白酶体途径特异性降解蛋白质的原理发展而来的一门技术，该技术通过构建 "融合蛋白"E3，能在翻译后水平降解蛋白；同转录水平的 RNA干扰技术相比，该技术能更灵活快速的"敲减"靶蛋白。胰腺癌是一种高度恶性的肿瘤，癌基因k-ras点突变在其发生发展中起着关键作用。本课题选定K-Ras癌蛋白作为靶向降解的分子，筛选鉴定能与K-Ras相互作用的结合结构域，并将其与能介导蛋白质降解的F-Box和U-Box功能结构域融合构建出E3，通过真核表达系统将融合质粒转染胰腺癌细胞达到"敲减"K-Ras的目的。对转染后胰腺癌细胞的增殖、侵袭等生物学特性进行检测，同时进行裸鼠实验，观察"敲减"K-Ras后的胰腺癌细胞在体内的致瘤性，并对其分子生物学机制进行探讨。本项目试图阐述"靶向泛素化降解蛋白质"技术在胰腺癌细胞中的作用机理，以期为胰腺癌的基因治疗提供新的实验基础和方法。

中文关键词： 胰腺癌；K-Ras；降解；E3泛素连接酶；细胞生长

英文摘要：

英文关键词： Pancreatic cancer；K-Ras；degradation；E3 ubiquitin ligase；cell growth