基于CRISPR/Cas9技术研究弓形虫毒力因子ROP5的转录调控机制

项目名称： 基于CRISPR/Cas9技术研究弓形虫毒力因子ROP5的转录调控机制

项目编号： No.81572026

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2015

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 陆绍红

作者单位： 浙江省医学科学院

项目金额： 25万元

中文摘要： 弓形虫（Toxoplasma gondii） 是广泛分布的机会性致病原虫，其感染已成为严重的世界性公共卫生问题。棒状体蛋白5（ROP5）是弓形虫重要的毒力因子，但是导致毒力差异的调控机制仍不明确。本研究拟利用CRISPR/Cas9系统（包括Cas9核酸酶和引导RNA）对弓形虫强、弱毒株（I型、Ⅲ型）rop 5基因上游调控序列进行编辑，结合瞬时转染、荧光素酶报告系统、Western-blot、弓形虫攻击感染等体内、体外实验手段，系统分析弓形虫ROP5上游序列rop5-ups的缺失与插入对rop5基因表达及对小鼠毒力的影响，阐明rop5基因上游序列对ROP5的转录调控机制，为寻找新的药物作用靶点和疫苗候选分子提供理论基础，对预防和控制弓形虫病具有重要科学意义。

中文关键词： 弓形虫；棒状体蛋白5；棒状体蛋白5上游序列；毒力；Crispr/cas9

英文摘要： Toxoplasma gondii is a widely distributed opportunistic protozoa，its infection has become a serious public health problem throughout the world. Rhoptry protein 5 (ROP5) is an important virulence factor of Toxoplasma gondii, but the regulational mechanism

英文关键词： Toxoplasma gondii；rop5；rop5-ups；virulence；Crispr/cas9