小菜蛾PxPPO基因的表达及转录调控机理研究

项目名称： 小菜蛾PxPPO基因的表达及转录调控机理研究

项目编号： No.31301730

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 薛超彬

作者单位： 山东农业大学

项目金额： 24万元

中文摘要： 昆虫酚氧化酶（PO）在昆虫的生长发育过程中具有重要的生理功能。本项目拟在前期研究的基础上，开展小菜蛾PxPPO基因的表达及转录调控机理研究。本研究拟构建PxPPO的原核、真核表达载体；克隆PxPPO1和PxPPO2的启动子，明确启动子的结构组成（M-box、E-box等）；克隆小眼畸形相关转录因子（MITF）并进行检测；应用染色质免疫沉淀技术（ChIP）和电泳迁移率变动实验（EMSA）研究小眼畸形相关转录因子（MITF）与启动子结构元件特异性结合的关系，从而探讨小眼畸形相关转录因子（MITF）参与的上调酚氧化酶活性的分子机理。本项目的开展可为酚氧化酶基因工程改造等研究奠定基础，为基因工程农药提供新思路。

中文关键词： 酚氧化酶基因；重组蛋白；基因转录表达；类绛色细胞；

英文摘要： Phenoloxidase (PO) has important physiological functions in the process of growth and development of insects. This project will carry out the study of the diamondback moth PxPPO gene expression and transcriptional regulation mechanism. This study intends to build PxPPO prokaryotic, eukaryotic expression vector, to clone the promoter of PxPPO, and to determine the structure character (including M-box, E-box, etc.) of the promoter. And, the study tries to clone the Microphthalmia-associated Transcription Factor (MITF) and to carry out its functional verification. This project by applying Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) and electrophoretic mobility shift assay (EMSA) to determine the specific binding relationship of MITF with the cis-acting elements, and to analyze the molecular mechanism of MITF up-regulating the phenoloxidase activity. The launching of the project is to lay the foundation for the phenoloxidase gene engineered, and to provide new ideas for the genetically engineered pesticides.

英文关键词： Phenoloxidase gene；recombinant protein；gene transcriptional expression；oenocytoid；