奶牛乳腺炎相关CD46和CD14基因单核苷酸突变导致异常转录本产生及异构体的功能分析

项目名称： 奶牛乳腺炎相关CD46和CD14基因单核苷酸突变导致异常转录本产生及异构体的功能分析

项目编号： No.31401049

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 王秀革

作者单位： 山东省农业科学院

项目金额： 25万元

中文摘要： 乳腺炎是由病原体等多种因素引起的复杂炎症，给奶牛业造成了巨大损失。课题组前期通过乳腺组织转录组测序发现CD46和CD14基因存在差异表达及异常剪切模式，后续实验验证CD46和CD14基因分别存在异常剪切生成的转录本CD46-AS和CD14-AS，及可能参与剪切的单核苷酸多态（SNP）。CD46是细胞膜上的一种受体，可结合入侵的链球菌，通过细胞内吞作用将其吞噬；而CD14可作为革兰氏阴性菌LPS受体参与大肠杆菌免疫反应。本项目拟在前期研究基础上，利用外显子捕获载体pSPL3验证候选SNPs是否参与CD46-AS和CD14-AS的生成,利用RT-PCR、RT-qPCR、Western Blot、原核表达、免疫荧光、真核表达和攻毒实验等技术，研究异常剪切体CD46-AS在乳腺不同生理状态下的差异表达、细胞定位及抗链球菌的作用；解析CD46和CD14基因表达调控的分子机制及其在乳腺炎抗性中的作用。

中文关键词： CD46基因；CD14基因；单核苷酸多态性；剪切变体；牛乳腺炎

英文摘要： Bovine mastitis is the most complex disease mostly caused by pathogens and it causes great losses in dairy farming. It is an inflammation of dairy mammary glands mainly in response to pathogens such as Streptococcus, Escherichia coli and Staphylococcus au

英文关键词： CD46 gene；CD14 gene；single nucleotide mutation；splice variant；bovine mastitis